Na AINIA, desenvolvemos novas ferramentas biotecnológicas e modelos in vitro avançados que nos permitem identificar moléculas com potencial terapêutico, melhorar a sua extração e direcioná-las especificamente para o cólon. Graças a tecnologias como o CO? supercrítico, modelos 3D e sistemas de libertação controlada, estamos agora mais próximos de novas estratégias naturais para abordar as doenças inflamatórias intestinais. Neste artigo, apresentamos em detalhe os resultados mais relevantes desta segunda fase anual.

Inovação para novas terapias direcionadas ao cólon

As doenças inflamatórias intestinais e o cancro colorrectal continuam a aumentar em todo o mundo. O seu impacto na qualidade de vida, aliado aos elevados custos associados aos cuidados de saúde, evidencia a necessidade de desenvolver soluções terapêuticas mais eficazes, seguras e baseadas em evidência científica sólida.

Neste contexto, o projeto PHARMANOVA II deu continuidade ao trabalho iniciado no primeiro ano, colaborando estreitamente com as empresas valencianas Nova Terra Foods e Monteloeder para avançar em ferramentas biotecnológicas e de engenharia de tecidos capazes de identificar, caracterizar e direcionar novas moléculas de origem natural para alvos terapêuticos chave no cólon.

Nesta nova fase, aprofundámos o trabalho em ferramentas de screening celular, modelos in vitro avançados, tecnologias de fracionamento com CO? supercrítico e sistemas de libertação controlada especificamente orientados para o cólon. Tudo isto com um objetivo claro: acelerar a investigação pré-clínica e criar novas oportunidades para o desenvolvimento de ingredientes e compostos com potencial terapêutico.

Neste vídeo, apresentamos uma visão clara e visual dos marcos e avanços do PHARMANOVA II — desde plataformas de screening e modelos organ-on-chip até estratégias de extração e libertação controlada desenvolvidas nesta nova etapa do projeto. Uma síntese dinâmica de como estamos a avançar para novas soluções baseadas em compostos naturais para patologias inflamatórias do cólon.

Novas ferramentas para identificar moléculas com atividade anti-inflamatória

Uma das principais linhas de trabalho tem sido o reforço da plataforma de screening celular desenvolvida no primeiro ano, focada no estudo dos processos inflamatórios intestinais.

O trabalho prosseguiu com a plataforma baseada numa linha celular reporter de inflamação, que permite avaliar de forma rápida e precisa a atividade anti-inflamatória de diferentes extratos naturais. Este ano, otimizámos o ensaio para confirmar a atividade anti-inflamatória do extrato de romã fornecido pela Monteloeder, bem como de várias frações obtidas por tecnologia com CO? supercrítico.

Paralelamente, avançámos no desenvolvimento de um modelo celular mais complexo: uma linha celular geneticamente modificada para recriar um ambiente de inflamação crónica semelhante ao observado em patologias como a colite ulcerosa ou a doença de Crohn. Este modelo permitirá estudar com maior precisão o comportamento de moléculas com potencial terapêutico num contexto mais representativo.

organ on chip

Modelos 3D e sistemas organ-on-chip para compreender melhor a resposta inflamatória

Outro avanço essencial do PHARMANOVA II foi a implementação de modelos in vitro mais realistas e fisiologicamente relevantes.

Implementámos tecnologia de cultura 3D através de um sistema spinner, para gerar esferoides de cólon a partir de células humanas de carcinoma colorrectal. A partir destes esferoides, estabelecemos um modelo inflamado que permite avaliar a eficácia de potenciais tratamentos num ambiente tridimensional muito mais próximo do tecido real. Neste sistema, estudámos o efeito anti-inflamatório tanto de um pós-biótico de referência como do extrato de romã utilizado no projeto.

Além disso, demos um passo adicional ao integrar a linha celular reporter de inflamação no sistema microfluídico gut-on-chip desenvolvido no PHARMANOVA I. Esta combinação permite monitorizar a inflamação em tempo real num sistema dinâmico que simula de forma mais fiel o comportamento intestinal. Validámos o sistema demonstrando a sua capacidade para detetar a redução da inflamação após a aplicação de frações de extrato de romã obtidas através de CO? supercrítico.

Em paralelo, iniciámos a exploração do potencial dos organoides intestinais como um modelo ainda mais avançado para o estudo dos mecanismos de ação de moléculas com interesse terapêutico.

 

Fracionamento com CO? supercrítico para obter extratos mais concentrados e estáveis

No domínio das tecnologias de separação, continuámos a desenvolver processos de fracionamento baseados em CO? supercrítico, uma ferramenta limpa e eficiente para obter frações vegetais enriquecidas em moléculas bioativas.

A partir de diferentes matérias-primas vegetais — com especial destaque para as fornecidas pela nossa empresa parceira Nova Terra Foods — obtivemos extratos mais estáveis à oxidação e com concentrações significativamente superiores de compostos minoritários, como tocoferóis e tocotrienóis, associados à atividade antioxidante e a possíveis benefícios em patologias inflamatórias.

Em alguns casos, estas frações apresentaram aumentos até 70% em alfa-tocoferol e até 50% em determinados tocotrienóis, quando comparadas com extratos obtidos através de técnicas convencionais.

  extracto co2 supercritico

Novas técnicas analíticas para quantificar compostos bioativos

Para caracterizar com precisão estes compostos naturais, desenvolvemos e validámos uma metodologia baseada em cromatografia líquida de alta eficiência com deteção por fluorescência (HPLC-FL) para a quantificação de tocotrienóis em óleo de pistáchio.

O método foi validado segundo critérios de reprodutibilidade, precisão e linearidade, confirmando a sua adequação para estudos pré-clínicos e para avaliar o impacto dos processos de fracionamento desenvolvidos no projeto.

Sistemas de libertação controlada que atuam onde são necessários

Outro eixo fundamental do projeto foi o desenvolvimento de sistemas de libertação controlada concebidos para proteger moléculas sensíveis e direcioná-las especificamente para o cólon.

Com base nos avanços do PHARMANOVA I, concebemos um sistema de dupla encapsulação que combina materiais mucoadesivos com revestimentos gastro-resistentes. Esta abordagem permite proteger compostos como o ácido butírico durante o trânsito gastrointestinal e favorecer a sua libertação exatamente no local onde exercem a sua ação biológica.

Os ensaios de digestão in vitro demonstraram que este sistema reduz a libertação nas fases iniciais da digestão, sugerindo uma chegada mais eficaz ao cólon.

Um projeto que impulsiona a inovação em saúde

Este projeto conta com o apoio do IVACE e dos fundos FEDER, o que nos permitiu continuar a avançar na geração de conhecimento e no desenvolvimento de tecnologias com potencial para transformar a abordagem das doenças inflamatórias do cólon.

Este segundo ano representou um exemplo importante de colaboração entre ciência e indústria. Trabalhámos estreitamente com Nova Terra Foods e Monteloeder, empresas da Comunidade Valenciana que forneceram matérias-primas, extratos e informação essencial para orientar os desenvolvimentos para aplicações reais.

Mantemos o nosso compromisso de promover novas oportunidades terapêuticas baseadas em compostos de origem natural e em modelos in vitro avançados, reforçando a colaboração com empresas e organizações do ecossistema da saúde.

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